期刊简介

               中华人民共和国卫生部主管,中华医学会主办。本刊是中国科技论文统计源期刊(核心期刊)和《中文核心期刊要目总览》入编期刊,以从事脑血管病基础理论研究和临床诊治工作的神经内科、神经外科、神经影像、神经介入、神经康复、神经急诊科医生为读者对象,报道脑血管病及相关学科领域的最新研究进展和临床诊疗经验。设有标准与指南、综述、论著、病例报道、学术争鸣、会议动态和医学简讯等栏目。                

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  • 杂志名称:国际脑血管病杂志
  • 主管单位:中华人民共和国卫生部
  • 主办单位:中华医学会,南方医科大学南方医院,海军总医院
  • 国际刊号:1673-4165
  • 国内刊号:11-5541/R
  • 出版周期:月刊
期刊荣誉:国家卫生部优秀期刊三等奖期刊收录:上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 维普收录(中), 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 万方收录(中)
国际脑血管病杂志2011年第07期

大鼠脑微血管周细胞的分离和鉴定

秦伟伟;鹿文葆;刘淑英;李宏伟;修瑞娟

关键词:周细胞, 血脑屏障, 细胞分离, 细胞培养技术, 大鼠
摘要:目的探讨大鼠脑微血管周细胞的分离、培养和鉴定方法。方法10只3周龄Wstar 大鼠,无菌分离脑组织,采用2次酶消化和1次密度梯度离心法分离脑微血管片段,接种于35 mm培养皿进行原代培养。采用相差显微镜观察细胞形态,免疫荧光法鉴定α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、神经元-胶质抗原2(neuron-glial antigen 2,NG2)、von Willebrand因子(von Willebrand factor,vWF)和胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)相关抗原,甲基噻唑基四唑法测定细胞生长曲线。结果周细胞从贴壁的脑微血管片段周围爬出,呈多角性,12~14 d后细胞融合95%。免疫荧光染色显示,周细胞分子标志物α-SMA和NG2相关抗原呈双阳性,vWF和GFAP 相关抗原呈双阴性,证实培养细胞为脑微血管周细胞。原代细胞初始生长速度较慢,传代细胞36~60h进入对数生长期,72~108 h生入平台期。结论该方法能成功分离出纯度较高的大鼠脑微血管周细胞。